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鸸鹋蛋壳粉对应激小鼠性功能精子活性的影响

                         鸸鹋蛋壳粉对应激小鼠性功能和幼龄小鼠精子活性的影响
                                           莫志贤,吴奕彬,黄沽春,郑永粲,阮亚林
                                        (南方医科大学中医药学院,广东广州 510515)
目的:观察国产鸸鹋蛋壳粉对应激小鼠性功能及幼龄小鼠精子活性的影响。

方法:以重复电刺激复制应激小鼠性行为障碍模型,观察雄性小鼠的交配能力。给正常幼龄雄性小鼠连续服药21d后检测其精子密度和精子活动率。

结果:鸸鹋蛋壳粉对电刺激应激诱发的雄性小鼠性功能障碍有促进恢复作用,能增加交配次数,缩短交配
潜伏时间,并能提高未成年雄性小鼠的精子活动率。

结论国产鸸鹋蛋壳粉具有增强雄性小鼠性功能,提高小鼠精子活性的作用。
关键词:鸸鹋蛋壳;交配试验; 应激;性功能;雄性小鼠

鹋蛋壳;交配试验; 应激;性功能;雄性小鼠 欣鑫农牧
Effects of Emu Eggshell on Sexual Function of Stressed Mice and Sperm Activity in Immature Mice MO Zhi—xian,WU Yi—bin,HUANG Jie—chun,ZHENG Yong—shen,RUAN Ya-lin(College of Traditional Chinese Medicine,Southern Medical University,Guangzhou 510515,China) Abstract:Objective Toinvestigatetheefectsofemu(DromaiusnovaehoUandiae)eggshelproducedinChillaon sexualability
inthe stressedmice andthe sperm activity immaturemi ce.Methods:A mod elof sexual deficiencyin malemi ce stressed bya
repeated electric stimulationwas established,thenmatingabilityofthemalemicewas examined.Emu eggshell(powder)Was giventoimmaturemalemi cefor21 daysand sperm activity ofmalemi ceWas detected .Results:Emu eggshel administration significan tly shortened thelatencytimeandin easedmatingfrequencyin stressed malemi ce.Sperm activity of immaturemale mi ce was increased afiggemueggsheladministrationfor21 days.Conclusion:EmueggshelproducedinChinacouldenhancesexual
functionin stressed malemi cean dpromotethe sperm activity inmalemi ceto acertain extent.Key words:emu eggshell;mating test;stress;sexual function;male mouse
中图分类号:Q959.713;R258.5 文献标识码:A 文章编号:1002.6630(2008)02.0373.03
鸸鹋蛋壳粉来自鸟纲鹤鸵科的大型走禽鸸鹋(emu)所产蛋的蛋壳。以澳大利亚土鸸鹋蛋壳粉为主要原料制成的保健产品天然伟哥(Natural V)已作为滋补剂在国外应用。研究表明:国产的鸸鹋蛋壳粉能增加成年雄性小鼠的交配次数,促进未成年雄性小鼠生殖器官的生长发育,对重复悬吊应激引起的雄性小鼠性功能障碍具有一定的促进功能恢复的作用。本实验在此基础上,对国产鸸鹋蛋壳粉的促进男性性功能作用进行深入的实验研究, 为国产的鸸鹋蛋壳在保健与治疗方面的开发利用提供进一步的科学依据。
1 材料与方法
1.1 药品与试剂
鸸鹋蛋壳粉(原种鸸鹋Dromaius novaehollandiae经由广东省农业厅验证,编号:粤0001739号) 广东英吉利实业有限公司;男宝胶囊(批号:0509014) 天津力生制药股份有限公司; 乙烯雌酚注射液(批号:051001)广州l白云山明兴制药有限公司;M199培养液 美国GIBCO公司;牛血清白蛋白(BSA) Sigma公司;大鼠精子培养液M199培养液加0.4% 牛血清白蛋白(临用前加入)。
1.2 动物
6~8周龄性成熟昆明种小鼠, 体重20~25g,雌雄各半;4周龄未成熟昆明种小鼠, 体重11~14g,雄
性, 均由南方医科大学实验动物中心提供, 动物合格证号:2005A042。收稿日期:2007.01.03
基金项目:广东省中医药局科研基金资助项目(1050127)
作者简介:莫志贤(1958一),女,教授,博士,研究方向为中药药理学。374 200&Vo1.29,No.02 良品科学 ※营养卫生
1.3 仪器
YSD.5药理、生理实验多用仪 蚌埠医学院无线电二厂; 电刺激箱仿文献制作 ,箱体体积30cm×15cm
× t5cm,木制。箱底平行铺设直径为4ram 的铜棒, 间距为4mm。电刺激由YSD.5药理、生理实验多用仪输出。
1.4 方法
1A.1 重复电刺激复复制应激小鼠性行为障碍模型取6周龄成年昆明种雄性小鼠50只,随机分为5组,即正常对照组(给予等体积的生理盐水),应激组(给予等体积的生理盐水)、鸸鹋蛋壳低量组(0.3g/kg),鸸鹋蛋壳高剂量组(0.6g/kg),阳性对照药组(男宝,0.35g/kg)。每组10只动物。按0.2ml/10g灌胃给药,连续给药7d。除正常对照组小鼠外,其他各组均采用重复电剌激应激法造成雄性小鼠性功能障碍的实验模型,仿文献报道的方法[3-4】略有改进。将小鼠放入电刺激箱中, 刺激电压36V,每秒电击1次,连续电击10次, 隔50s再电击10次,如此进行10次循环。电击时间安排在每天下午3:00~4:00。每天电击1次,连续3d。(在给药的第5d开始电激, 电激后1 h给药)。
1.4.2 小鼠交配试验
参考文献报道的方法【s】, 以上各组小鼠于末次给药后60min进行交配试验。雌性小鼠于实验前3d连续给予乙烯雌酚,每天按1mg/kg皮下注射给药,使之进入动情期【za】。小鼠交配试验开始时先将单只雄性小鼠放入30cm ×15cm × 15cm的交配箱中适应5min,然后放进2只雌性小鼠。记录合笼至第一次交配的时间(即交配潜伏期)及20rain内交配的次数。观察时间为20:00~23:00,交配试验在弱光、安静条件下进行。
1.4.3 正常幼龄雄性小鼠精子数和精子活动百分率测定根据文献报道的方法【 】,取未成熟雄性小鼠40只,随机分为4组,即正常对照组(给予等体积的生理盐水),鸸鹋蛋壳低量组(0.3g/kg),鸸鹋蛋壳高剂量组(0.6g/kg),阳性对照药组(男宝,0.35g/kg)。每组10只动物。按0.2ml/10g灌胃给药,连续给药21d。于末次给药24h后,称体重,然后将小鼠脱颈椎处死,迅速取出两侧附睾,称重,然后将双侧附睾置于精子培养液(1:500,W:V)中,37℃温育1rain后用小剪刀快速剪碎,制成精子悬液。取50u l精子悬液滴于玻片上计数5个高倍视野,取其平均值作为1个高倍视野的精子数。另取50u l充入血球计数板中,于高倍镜下观察200个精子,计算活动精子数。
1.5 统计学分析
实验数据以 ±SD)表示,应用SPSS 10.0统计软件进行完全随机设计资料的单因素方差分析和t检验。
2 结果与分析
2.1 鸸鹋蛋壳粉对重复电刺激应激模型小鼠交配能力的影响,结果表明,经重复电刺激应激3d后,成年雄性小鼠的交配能力明显下降。模型组小鼠交配试验的潜伏期及交配次数与正常对照组小鼠相比,差异有显著性(p<0.O1)。鸸鹋蛋壳粉高剂量组及男宝组雄性小鼠交配的潜伏期和交配次数与模型对照组比较,差异有显著性意义(p<0.01或P< 0.O1),与正常对照组比较,差异无显著性(p>0.05)。鸸鹋蛋壳粉低剂量组小鼠交配的潜伏期及交配次数与正常对照组小鼠相比,差异有显著性(p<0.05);与模型对照组比较,交配潜伏期差异无显著意义(p>0.05),但交配次数则有显著性差异(p<0.01)。见表1。
表1 鸸鹋蛋壳粉对应激雄性小鼠交配能力的影响(n=lO)Table 1 Efects of emu eggshell on mating ability of stressed male mice stressed(n=l0)
注: p<0.05,} p<0.01,与正常对照组比较。。P< 0.05, P<0.01,与模型对照组比较。
2.2鸸鹋蛋壳粉对正常幼龄雄性小鼠精子密度和精子活动力的影响,实验结果如表2所示,未成熟的雄性小鼠连续服用受试药物21d,各组小鼠附睾的精子密度未见明显差异(p>0.05)。鸸鹋蛋壳粉高剂量组小鼠精子活动率与空白对照组比较,差异有显著意义(p<0.05),鸸鹋蛋壳粉低剂量组及男宝组小鼠精子活动率也有所提高, 但与空白对照组比较, 差异无显著意义(p>0.05)。表2 鸸鹋蛋壳粉对幼龄雄性小鼠精子密度及精子活动率的影响(n=l0)Table 2 Efects of emu eggshell on activity and number of sperm in male mice(n=l0)注:·P
3 讨 论
※营养卫生 艮品科学 2008,Vo1.29,No.02 375鸸鹋蛋壳含有多种天然有机物质和微量元素, 对维持男性性功能具的十分重要的作用, 并能促进血液循环、提高男性机体活力i7-8]。本实验采用反复电刺激诱发成年雄性小鼠的身体和心理应激, 引起受试动物神经系统紧张、焦虑、恐惧、挣扎、内分泌代谢紊乱及性行为抑制等障碍【3.钔。从本实验结果来看,经重复电刺激后,雄性小鼠的交配能力明显下降。鸸鹋蛋壳高剂量组(0.6g/kg bw)用药7d后,小鼠交配的潜伏期缩短,交配次数明显增多。提示鸸鹋蛋壳粉对电刺激应激所致的雄性小鼠性功能障碍有一定程度的防治作用。本实验给未成熟的幼龄雄性小鼠连续使用高(0.6g/kgbw)、低(0.3g/kg bw)剂量的鸸鹋蛋壳粉21d,小鼠精子活动率有所增加, 但本实验未发现鸸鹋蛋壳粉对雄性小鼠的精子密度有明显影响。鸸鹋蛋壳粉对雄性小鼠性功能的影响与阳性对照药男宝相似,但两药的作用机理尚有待深入研究。
参考文献:
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